Evaluación de tres métodos moleculares para el rastreo e identificación de HER2/neu en pacientes con cáncer de mama / Evaluation of three molecular methods for tracking and identifying HER2/neu oncogene in breast cancer patients

Objetivo: comparar las técnicas de IHQ, FISH y PCR cuantitativa en tiempo real, en la determinación de la amplificación ysobre-expresión de HER2/neu en 70 tumores de mama. Metodología: se evaluaron las características operativas de la IHQ HercepTest y la PCR cuantitativa en tiempo real. Paraello se tomó como estándar de oro la hibridización fluorescente in situ. Se determinó el porcentaje de positividad de tumores de mama que tienen amplificación génica de HER2/neu.Resultados: el 38% de tumores de mama muestra amplificación para HER2/neu, de acuerdo con la PCR en tiempo real. Se encontró una concordancia del 80% entre la PCR en tiempo real y la FISH en los casos catalogados como equívocos grado2+ por IHQ. Conclusión: los resultados obtenidos sugieren que los análisis por PCR en tiempo real son una alternativa válida en casos en los que se pueda usar la técnica de FISH para la reevaluación de los tumores de mama catalogados equívocos o grado 2+para HER2/neu por IHQ. Mediante la combinación de la IHQ y la PCR cuantitativa en tiempo real se puede llegar a una buena aproximación en la determinación de los grados expresión y amplificación de HER2/neu en pacientes con cáncer de mama.

Objective: to compare IHC, FISH and quantitative real-time PCR techniques, in the determination of HER2/neu oncogene amplification and overexpression in 70 breast cancer patients. Methods: we evaluated the performance of the IHC HercepTest and quantitative real-time PCR techniques, using as a gold standard the fluorescent in situ hybridization technique. We determined the positivity percentage of the breast neoplasms that have the amplification for HER2/neu oncogene.Results: 38% of breast tumors demonstrate amplification of HER2/neu oncogene according to real-time PCR and we found an 80% concordance for real-time PCR and FISH in cases classified as equivocal or grade 2+ with IHC. Conclusion: the results of this study suggest that the analysis by real-time PCR is a valid alternative in cases when it is not possible to use the FISH technique for reassessment of breast neoplasms classified as equivocal or grade 2+ for HER2/neu with IHC. The combination of IHC and quantitative real-time PCR may be a good approach in the determination of the expression and amplification status of HER2/neu in breast cancer patients.

Cáncer de mama: HER2/neu, métodos diagnósticos y consideraciones clínicas / HER2/neu and Breast Cancer: Diagnosis and Clinical Issues

El cáncer de mama es una de las primeras causas de muerte de mujeres en el mundo. En Colombia, es la segunda causa de muerte de mujeres por cáncer, después del cáncer de cuello uterino. Aunque no se ha establecido una causa específica para el desarrollo del cáncer, se sabe que el cáncer de mama es el resultado de la acumulación de daños en el ácido desoxirribonucleico (DNA) de las células del tejido mamario. Se han identificado numerosos genes cuyas alteraciones afectan el crecimiento normal de la célula, llevándola al desarrollo y progresión del cáncer de mama. Uno de estos genes es el HER2/neu. La proteína codificada por el gen HER2/neu se encuentra sobreexpresada en un 25porciento-30porciento de los cánceres de mama; así, el HER2/neu es el oncogén de más alta incidencia en esta enfermedad. Actualmente, existen diferentes métodos moleculares paraidentificar la amplificación de este gen o la expresión de su producto. Aunque sólo dos de estos métodos diagnósticos (la inmunohistoquímica y la hibridación fluorescente in situ) se encuentran aprobados por la Administración de Drogas y Alimentos de los Estados Unidos (FDA), la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real y la hibridación cromogénica in situ prometen ser los métodos diagnósticos del futuro. La importancia clínica de medir la amplificación del gen HER2/neu radica en que la sobreexpresión de la proteína HER2/neu indica peor pronóstico y, por lo tanto, cambio de tratamiento, como el empleo del anticuerpo monoclonal humanizado trastuzumab.

Breast cancer is one of the first causes of death in women on the world. In Colombia it is the second cause of death in women with cancer after the carcinoma of cervix uteri. Although the specific cause is not known, it is know that breast cancer is the result of the accumulation of damages in the DNA of the cells of the mammary tissue. Numerous genes have been identified whose alterations affect the normal growth of the cell, taking it to the development and progression of the breast cancer. One of these genes it is the HER2/neu. The protein codified by HER2/neu gene, is overexpressed in 25% to 30% of the breast cancer, the HER2/neu is the oncogen of higher incidence in the disease. At the present time different molecular methods exist to identify the amplification of this gene or the expression of their product. Although only two of these diagnostic methods (the Immunohistochemistry and the fluorescence in situ hybridization) they are approved by the Administration of Drugs and Foods of the United States of America (FDA), the polymerase chain reaction in real time and the cromogenic in situ hybridization, not yet approved by the FDA, promise to be the methods to be used to in the future diagnoses, due to his high sensitivity, specificity, easy handling and low costs. The clinical importance to measure the amplification of the HER2/neu gene is in which overexpression of the HER2/neu protein indicates worse prognosis, and therefore the change of treatment, like the use of the monoclonal antibody humanized trastuzumab.